Tác dụng của curcumin giúp tế bào ung thư dạ dày tự chết theo chu trình Apoptotic

Tinh chất nghệ vàng Curcumin có tác dụng thúc đẩy tế bào ung thư dạ dày tự chết theo chu trình apoptotic đã được chứng minh lâm sàng.

Các tác giả: Ngụy Li Ying Chu Kim Dương Li Li Trương Trương Trương Ping Trịnh

Xuất bản trực tuyến vào ngày: 11 tháng 5 năm 2017 https://doi.org/10.3892/or.2017.5637

Đường link của bài báo https://www.spandidos-publications.com/10.3892/or.2017.5637

[toc]

Tóm tắt

Curcumin sở hữu tác dụng chống ung thư chống lại các loại khối u rộng với độc tế bào chọn lọc cho các tế bào khối u. Tuy nhiên, cơ chế liên quan đến tác dụng chống ung thư do curcumin gây ra vẫn chưa rõ ràng. Trong nghiên cứu hiện tại, chúng tôi đã nghiên cứu hiệu quả của curcumin chống lại sự phát triển tế bào ung thư dạ dày của con người và cơ chế phân tử liên quan. Kết quả của chúng tôi đã chứng minh rằng chất curcumin ức chế khả năng sống sót của các dòng tế bào ung thư dạ dày BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 theo cả cách thức phụ thuộc vào thời gian và liều lượng. Ngoài ra, điều trị bằng curcumin gây ra apoptosis tế bào ung thư dạ dày với liều lượng ‑ đáp ứng. Các loại protein liên quan đến apoptosis của phương Tây đã khẳng định thêm khả năng gây apoptotic của curcumin. Sau khi tiếp xúc với chất curcumin, một cảm ứng mạnh mẽ của bệnh tự kỷ đã được quan sát thấy trong các tế bào ung thư dạ dày, được đặc trưng bởi sự hình thành các bào quan có tính axit (AVOs), chuyển đổi LC3-I thành LC3-II và tăng mức độ protein liên quan đến autophagy. Kích hoạt đường dẫn tín hiệu PI3K / Akt / mTOR đã bị ức chế trong các tế bào ung thư dạ dày với điều trị bằng curcumin. Tuy nhiên, sử dụng thuốc ức chế autophagy 3-methyladenine (3-MA) ​​đã thúc đẩy đáng kể sự chết tế bào apoptotic gây ra bởi curcumin. Nói chung, các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mới cho thấy chất curcumin gây ra cái chết tế bào apoptotic và sự tự trị bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm. Điều trị bằng thuốc ức chế autophagy có thể cung cấp một chiến lược mới và hiệu quả để cải thiện tác dụng chống ung thư của curcumin chống ung thư dạ dày. chuyển đổi LC3-I thành LC3-II và tăng mức độ protein liên quan đến tự kỷ. Kích hoạt đường dẫn tín hiệu PI3K / Akt / mTOR đã bị ức chế trong các tế bào ung thư dạ dày với điều trị bằng curcumin. Tuy nhiên, sử dụng thuốc ức chế autophagy 3-methyladenine (3-MA) ​​đã thúc đẩy đáng kể sự chết tế bào apoptotic gây ra bởi curcumin. Nói chung, các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mới cho thấy chất curcumin gây ra cái chết tế bào apoptotic và sự tự trị bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm. Điều trị bằng thuốc ức chế autophagy có thể cung cấp một chiến lược mới và hiệu quả để cải thiện tác dụng chống ung thư của curcumin chống ung thư dạ dày. chuyển đổi LC3-I thành LC3-II và tăng mức độ protein liên quan đến tự kỷ. Kích hoạt đường dẫn tín hiệu PI3K / Akt / mTOR đã bị ức chế trong các tế bào ung thư dạ dày với điều trị bằng curcumin. Tuy nhiên, sử dụng thuốc ức chế autophagy 3-methyladenine (3-MA) ​​đã thúc đẩy đáng kể sự chết tế bào apoptotic gây ra bởi curcumin. Nói chung, các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mới cho thấy chất curcumin gây ra cái chết tế bào apoptotic và sự tự trị bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm. Điều trị bằng thuốc ức chế autophagy có thể cung cấp một chiến lược mới và hiệu quả để cải thiện tác dụng chống ung thư của curcumin chống ung thư dạ dày. Sử dụng chất ức chế autophagy 3-methyladenine (3-MA) ​​đã thúc đẩy đáng kể sự chết tế bào apoptotic gây ra bởi curcumin. Nói chung, các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mới cho thấy chất curcumin gây ra cái chết tế bào apoptotic và sự tự trị bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm. Điều trị bằng thuốc ức chế autophagy có thể cung cấp một chiến lược mới và hiệu quả để cải thiện tác dụng chống ung thư của curcumin chống ung thư dạ dày. Sử dụng chất ức chế autophagy 3-methyladenine (3-MA) ​​đã thúc đẩy đáng kể sự chết tế bào apoptotic gây ra bởi curcumin. Nói chung, các phát hiện của chúng tôi cung cấp bằng chứng mới cho thấy chất curcumin gây ra cái chết tế bào apoptotic và sự tự trị bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm. Điều trị bằng thuốc ức chế autophagy có thể cung cấp một chiến lược mới và hiệu quả để cải thiện tác dụng chống ung thư của curcumin chống ung thư dạ dày.

Giới thiệu

Ung thư dạ dày là một trong những khối u ác tính phổ biến nhất trên toàn thế giới ( 1 ). Mặc dù những cải thiện trong chẩn đoán và điều trị sớm đã được thực hiện gần đây, tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ tử vong vẫn còn cao ( 2 ). Đối với bệnh nhân ung thư dạ dày tiến triển, hóa trị vẫn là chế độ trị liệu chính là liệu pháp bổ trợ trước phẫu thuật và sau phẫu thuật ( 3 , 4 ).

Curcumin, một polyphenol được chiết xuất từ ​​củ nghệ ( Curcuma longa ), là một tác nhân có khả năng chống ung thư chống lại các loại khối u khác nhau. Là một hợp chất tự nhiên, nó đã được chứng minh là có hiệu quả với độc tính tối thiểu, tác dụng chọn lọc trên các tế bào ung thư so với các tế bào bình thường ( 5 , 6 ). Cho đến nay, curcumin và chất tương tự của nó đã được báo cáo đóng vai trò chống ung thư trong một số mô hình khối u, bao gồm u nguyên bào thần kinh đệm ( 7 ), gan ( 8 ), đại trực tràng ( 9 ), phổi ( 10 ), buồng trứng ( 11 ), vú ( 12 ) và uống ( 13) ung thư. Các cơ chế cơ bản đã được chứng minh là có liên quan đến sự ức chế sự tăng sinh, hình thành mạch, sự xâm lấn và di căn của các tế bào ung thư, hoặc cảm ứng apoptosis bởi curcumin ( 14 – 16 ). Tuy nhiên, nghiên cứu về tác dụng chống ung thư của curcumin chống lại ung thư dạ dày và cơ chế phân tử liên quan vẫn còn được làm sáng tỏ.

Autophagy, một quá trình tự suy thoái mà được đánh giá cao bảo tồn giữa các loại khác nhau của tế bào động vật có vú, đã được chứng minh trong các nghiên cứu để đóng một quan trọng, và vai trò trong sự phát triển ung thư và sự phát triển cũng như sức đề kháng trị (phức tạp 17 – 19 ). Autophagy là một quá trình nội bào bắt đầu với sự hình thành các túi màng kép. Sau đó, nội dung của các túi, protein tồn tại lâu dài và các bào quan bị hư hỏng, được chuyển đến lysosome để phân hủy. Nó đã được tìm thấy rằng autophagy gây ảnh hưởng kép đối với bệnh ung thư ( 17 , 18 ). Một mặt, autophagy có thể hoạt động như một chất ức chế khối u bằng cách bảo tồn tính toàn vẹn của tế bào. Các tế bào thiếu autophagy dễ bị phát triển khối u trong cơ thể. Mặt khác, autophagy có thể đóng một vai trò gây ung thư bằng cách duy trì sự sống của tế bào khối u và ngăn chặn sự chết tế bào apoptotic sau khi điều trị chống ung thư. Gần đây, một số nghiên cứu đã chứng minh rằng các hợp chất tự nhiên có khả năng chống ung thư có thể gây ra bệnh tự kỷ ở các loại khối u khác nhau ( 20 – 22 ). Tuy nhiên, vai trò chính xác của autophagy (thuốc ức chế khối u hoặc chất kích thích) liên quan đến cơ chế gây chết tế bào ung thư do hợp chất tự nhiên cần được nghiên cứu thêm.

Trong nghiên cứu hiện tại, tác dụng chống ung thư của curcumin đối với ung thư dạ dày ở người và cơ chế cơ bản đã được nghiên cứu. Chúng tôi đã thiết kế nghiên cứu để xác định vai trò điều tiết của curcumin trong sự sống sót hoặc apoptosis của ba dòng tế bào ung thư dạ dày khác nhau BGC-823, SGC-7901 và MKN-28. Sau đó, tác dụng của autophagy gây ra bởi curcumin đối với các tế bào ung thư dạ dày và cơ chế phân tử liên quan đã được làm sáng tỏ thêm.

Vật liệu và phương pháp

Nuôi cấy tế bào và thuốc thử

Các dòng tế bào ung thư dạ dày của con người BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 là quà tặng của Bệnh viện liên kết đầu tiên của Đại học Soochow (Giang Tô, Trung Quốc). Các tế bào được nuôi cấy thường xuyên trong môi trường RPMI-1640 được bổ sung 10% (v / v) huyết thanh bào thai bào thai (FBS) (cả hai từ Gibco, Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, USA) ở 37 ° C trong môi trường ẩm 5% CO 2 . Các tế bào tuân thủ được nuôi cấy cứ sau 2 ngày 3 và được thu hoạch cho các thí nghiệm tiếp theo.

Các thuốc thử curcumin (C1386), MTT (M2128), acridine cam (AO; A6014), 3-methyladenine (3-MA; M9281) và dimethyl sulfoxide (DMSO; D2650) được sử dụng trong nghiên cứu này, đều được lấy từ Sigma- Aldrich (St. Louis, Mo, Hoa Kỳ). Curcumin hoặc chất ức chế autophagy 3-MA đã được hòa tan trong DMSO dưới dạng dung dịch gốc và giữ ở −20 ° C trước khi sử dụng. Ngoài ra, MTT hoặc AO đã được hòa tan trong dung dịch muối đệm phốt phát (PBS) để chuẩn bị dung dịch.

Xét nghiệm khả năng sống của tế bào

Tác dụng điều chỉnh của curcumin đối với sự phát triển của tế bào ung thư dạ dày được đánh giá bằng xét nghiệm MTT. Tóm lại, các tế bào được gieo hạt với mật độ 1 × 10 4 tế bào / giếng trong đĩa nuôi cấy 96 giếng, được ủ qua đêm và được xử lý có hoặc không tăng lượng curcumin (0 đùa200 NottM) trong 24, 48 và 72 h, tương ứng . Sau đó, 10 dung dịch MTT (5 mg / ml) được thêm vào từng giếng và được ủ với các tế bào ở 37 ° C trong 4 giờ nữa. Sau đó, dung dịch đã bị loại bỏ và 150 lượng DMSO được thêm vào các tế bào còn lại để hòa tan các tinh thể formazan. Mật độ quang học (OD) tại 490nm được đo bằng đầu đọc vi bản (Điểm chuẩn, Phòng thí nghiệm Bio-Rad, Hercules, CA, Hoa Kỳ). Công thức được sử dụng trong nghiên cứu này là: Khả năng sống của tế bào (%) = (OD của mẫu thử nghiệm / OD của nhóm đối chứng) × 100%.

Xét nghiệm TUNEL

Nhuộm TUNEL đã được thực hiện trong nghiên cứu hiện tại để xác định tác dụng thúc đẩy apoptosis của curcumin đối với các tế bào ung thư dạ dày. Tóm lại, các tế bào được gieo vào một đĩa 24 giếng với mật độ 7 × 10 4 tế bào / giếng. Sau khi ủ qua đêm, các tế bào ung thư dạ dày được tiếp xúc với nồng độ curcumin được chỉ định trong 48 giờ. Sau đó, các tế bào được cố định với 4% paraformaldehyd và nhuộm cho xét nghiệm TUNEL. Trong nghiên cứu hiện tại, nhuộm TUNEL được thực hiện với bộ xét nghiệm Apoptosis One Step TUNEL (Công nghệ sinh học Beyotime, Nam Thông, Trung Quốc) theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Sau đó, các tế bào được quan sát và chụp ảnh dưới kính hiển vi huỳnh quang (Olympus Quang Co., Hamburg, Đức) và các hạt nhân nhuộm màu đỏ được coi là dương tính với TUNEL.

Phân tích tế bào học dòng chảy

Dòng tế bào học được sử dụng để xác nhận tác dụng gây ra apoptosis của curcumin trên các tế bào ung thư dạ dày. Sau 12 giờ ủ, các tế bào ung thư dạ dày được gieo vào một đĩa 6 giếng (3 × 10 5 tế bào / giếng) đã được điều trị với lượng curcumin được chỉ định trong 48 giờ. Sau đó, các tế bào được thu hoạch, rửa bằng PBS lạnh băng và được treo lại với môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh. Việc đình chỉ tế bào được ủ với bộ xét nghiệm Muse ™ Phụ lục V & Dead Cell Assay (EMD Millipore, Hayward, CA, USA) theo hướng dẫn của nhà sản xuất và được phân tích trên hệ thống Phân tích tế bào Muse ™ (EMD Millipore). Dữ liệu được phân tích bằng phần mềm Phân tích Muse ™ (EMD Millipore).

Tây phương

Một xét nghiệm làm mờ vết rạn da phương Tây đã được thực hiện để đánh giá biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis hoặc autophagy trong các tế bào ung thư dạ dày của con người. Sau khi tiếp xúc với lượng curcumin được chỉ định trong 48 giờ, các tế bào được thu hoạch và hòa tan trong dung dịch đệm RIPA lạnh có bổ sung chất ức chế protease hoàn chỉnh. Một lượng bằng nhau của các lysate tế bào được tách ra trên SDS-PAGE và được chuyển điện di sang màng polyvinylidine fluoride (PVDF). Các màng này sau đó được chặn với sữa làm mờ lớp 5% (w / v) trong 1 giờ và sau đó được ủ với các kháng thể chính qua đêm ở 4 ° C. Các kháng thể chính chống Bcl-2, chống Bax, chống caspase-3 và chống caspase-9 được mua từ Merck-Millipore (Billerica, MA, USA); chống LC3 được lấy từ Abcam (Cambridge, MA, USA); Anti-Beclin1 và anti-Atg7 được mua từ Abgent (San Diego, CA, USA); anti-Atg12-Atg5, anti-p-Akt, anti-Akt, anti-p-mTOR, anti-mTOR, anti-p-p70S6K và anti-p70S6K được lấy từ Công nghệ Tín hiệu Tế bào (Beverly, MA, USA). Anti-act-actin (Công nghệ sinh học Santa Cruz, Santa Cruz, CA, Hoa Kỳ) đã được sử dụng như một biện pháp kiểm soát nội bộ. Sau đó, các màng được rửa và xử lý bằng các kháng thể thứ cấp liên hợp HRP trong 2 giờ và các kháng thể liên kết được hiển thị bằng thuốc thử tăng cường hóa phát quang (ECL) (Công nghệ sinh học Beyotime).

Phát hiện các bào quan có tính axit (AVOs)

Acridine màu da cam (AO) đã được sử dụng để xác định axit hóa không bào của autophagosome, đó là một đặc tính của autophagy hiệu quả. Tóm lại, các tế bào ung thư dạ dày được gieo vào đĩa 6 giếng với mật độ 3 × 10 5 tế bào / giếng và được ủ qua đêm. Sau khi tiếp xúc với nồng độ curcumin được chỉ định trong 48 giờ, các tế bào được xử lý bằng AO (1 Khăng / ml) trong 15 phút, rửa bằng PBS và hiển thị dưới kính hiển vi huỳnh quang (Olympus Quang Co.). Sự phát huỳnh quang màu đỏ cam trong tế bào chất được công nhận là nhuộm màu dương tính với AO.

Phân tích thống kê

Tất cả dữ liệu định lượng được biểu thị dưới dạng trung bình ± SEM và được vẽ bằng phần mềm GraphPad Prism 6.0 (Phần mềm GraphPad, La Jolla, CA, Hoa Kỳ). Phân tích thống kê được thực hiện bằng thử nghiệm Mann-Whitney U không tham số bằng phần mềm thống kê SPSS 16.0 và giá trị P <0,05 được coi là có ý nghĩa thống kê.

Các kết quả

Tăng sinh tế bào ung thư dạ dày được điều hòa bởi curcumin

Để xác nhận vai trò tiềm năng của curcumin đối với sự phát triển của tế bào ung thư dạ dày, chúng tôi đã thực hiện xét nghiệm MTT để đánh giá khả năng sống của tế bào sau khi điều trị bằng curcumin trong một phạm vi nồng độ rộng (0 .200200M). Như trong hình 1A , curcumin đã ức chế sự tăng sinh của ba dòng tế bào ung thư dạ dày khác nhau BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 theo cả hai cách phụ thuộc vào thời gian và liều lượng, mặc dù ở các mức độ khác nhau. IC 50 giá trị của curcumin chống lại tế bào ung thư dạ dày được thể hiện trong

Bảng I . Sau 24 giờ nuôi cấy, các tế bào MKN-28 nhạy cảm nhất với curcumin (IC 50 = 16,17 PhongM) và các tế bào SGC-7901 có khả năng kháng cao nhất (IC 50 = 50,45 NottM), trong khi các tế bào BGC-823 cung cấp một độ nhạy trung gian (IC50 = 37,58 ĐÁM). Vào 48 giờ sau khi điều trị, giá trị IC 50 của từng dòng tế bào giảm và tương tự nhau. Do đó, tác dụng điều tiết của curcumin đối với các tế bào ung thư dạ dày đã được quan sát thấy sau 48 giờ tiếp xúc trong các nghiên cứu sau đây của chúng tôi, ở một phạm vi nồng độ trong khoảng từ 0 đến 20.

Hình 1. – Tính khả thi và apoptosis trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được xử lý bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 24, 48 và 72 giờ và khả năng sống của tế bào được đánh giá bằng xét nghiệm MTT. (B) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ tăng dần trong 48 giờ và chết tế bào apoptotic được xác định bằng nhuộm TUNEL (độ phóng đại, × 200). BGC-823: a, DMSO; b, 5 congMumin curcumin; c, 10 congM curcumin; d, 15 congMumin curcumin. SGC-7901 và MKN-28: a, DMSO; b, 5 congMumin curcumin; c, 10 congM curcumin; d, 20 CurMumin curcumin. Cur, curcumin.Hình 1. – Tính khả thi và apoptosis trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được xử lý bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 24, 48 và 72 giờ và khả năng sống của tế bào được đánh giá bằng xét nghiệm MTT. (B) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ tăng dần trong 48 giờ và chết tế bào apoptotic được xác định bằng nhuộm TUNEL (độ phóng đại, × 200). BGC-823: a, DMSO; b, 5 congMumin curcumin; c, 10 congM curcumin; d, 15 congMumin curcumin. SGC-7901 và MKN-28: a, DMSO; b, 5 congMumin curcumin; c, 10 congM curcumin; d, 20 CurMumin curcumin. Cur, curcumin.

Bảng I. – Giá trị IC50 (TUM) của curcumin chống lại các tế bào ung thư dạ dày.Bảng I. – Giá trị IC50 (TUM) của curcumin chống lại các tế bào ung thư dạ dày.

Sự chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày được gây ra bởi curcumin

Để khám phá tác dụng của curcumin đối với apoptosis tế bào ung thư dạ dày, sự kết hợp của nhuộm TUNEL, tế bào học dòng chảy và xét nghiệm làm mờ vết rạn da phương Tây đã được thực hiện trong cuộc điều tra của chúng tôi. Như trong hình 1B , nhân của các tế bào ung thư dạ dày được điều trị bằng curcumin được ngưng tụ và thể hiện huỳnh quang màu đỏ tươi ở 48 giờ sau điều trị theo cách phụ thuộc vào liều. Phù hợp với quan sát này, kết quả phân tích tế bào học dòng chảy cho thấy sự gia tăng đáng kể về dân số apoptotic (apoptosis sớm cộng với apoptosis muộn) của các tế bào ung thư dạ dày được điều trị với nồng độ curcumin tăng, so với nhóm kiểm soát DMSO ( Hình 2A ) . Hơn nữa, phương Tây đã được sử dụng để phát hiện các biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis. Hình 2Btiết lộ rằng chất curcumin gây ra đáng kể sự điều hòa của Bcl-2 và sự điều hòa của biểu hiện Bax trong cả ba dòng tế bào ung thư dạ dày. Hơn nữa, curcumin phân tách rõ ràng pro-caspase-3 và −9 thành các dạng hoạt động của chúng trong mỗi dòng tế bào ung thư dạ dày với nồng độ trên 10 PhaM. Do đó, các quan sát đã nói ở trên cho thấy chất curcumin có thể gây chết tế bào apoptotic trong tế bào ung thư dạ dày của con người theo cách phụ thuộc vào liều.

Hình 2. – Sự chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày của con người được xác nhận bằng phương pháp tế bào học dòng chảy và vết rộp phía tây sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và apoptosis được phát hiện bằng phương pháp tế bào học dòng chảy với nhuộm Phụ lục V. (B) Sau khi điều trị bằng curcumin ở nồng độ được chỉ định trong 48 giờ, biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis trong các tế bào ung thư dạ dày đã được phát hiện bằng cách làm mờ vết rạn da phương Tây. Cur, curcumin.Hình 2. – Sự chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày của con người được xác nhận bằng phương pháp tế bào học dòng chảy và vết rộp phía tây sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và apoptosis được phát hiện bằng phương pháp tế bào học dòng chảy với nhuộm Phụ lục V. (B) Sau khi điều trị bằng curcumin ở nồng độ được chỉ định trong 48 giờ, biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis trong các tế bào ung thư dạ dày đã được phát hiện bằng cách làm mờ vết rạn da phương Tây. Cur, curcumin.

Autophagy trong các tế bào ung thư dạ dày được gây ra bởi curcumin

Nó đã được báo cáo rằng apoptosis và autophagy có mối quan hệ phức tạp trong quá trình chết tế bào ung thư ( 23 , 24 ). Do đó, chúng tôi tự hỏi liệu việc kích hoạt autophagy cũng có liên quan đến tác dụng chống ung thư của curcumin hay không. Để xác nhận khả năng của curcumin kích hoạt autophagy trong tế bào ung thư dạ dày của con người, trước tiên chúng tôi đã thực hiện nhuộm AO để đánh giá sự hình thành AVOs, một đặc tính của autophagolysosome, trong các tế bào ung thư được điều trị bằng curcumin. Như được hiển thị trong Hình. 3, điều trị bằng curcumin dẫn đến sự tích tụ rõ rệt của không bào autophagic màu đỏ cam trong cả ba dòng tế bào (BGC-823, SGC-7901 và MKN-28) theo cách phụ thuộc vào liều, trong khi nhóm kiểm soát DMSO hiển thị huỳnh quang màu xanh lá cây, cho thấy sự vắng mặt của sự hình thành AVO trong tế bào chất.Autophagy trong các tế bào ung thư dạ dày được gây ra bởi curcumin

Nó đã được báo cáo rằng apoptosis và autophagy có mối quan hệ phức tạp trong quá trình chết tế bào ung thư ( 23 , 24 ). Do đó, chúng tôi tự hỏi liệu việc kích hoạt autophagy cũng có liên quan đến tác dụng chống ung thư của curcumin hay không. Để xác nhận khả năng của curcumin kích hoạt autophagy trong tế bào ung thư dạ dày của con người, trước tiên chúng tôi đã thực hiện nhuộm AO để đánh giá sự hình thành AVOs, một đặc tính của autophagolysosome, trong các tế bào ung thư được điều trị bằng curcumin. Như được hiển thị trong Hình. 3, điều trị bằng curcumin dẫn đến sự tích tụ rõ rệt của không bào autophagic màu đỏ cam trong cả ba dòng tế bào (BGC-823, SGC-7901 và MKN-28) theo cách phụ thuộc vào liều, trong khi nhóm kiểm soát DMSO hiển thị huỳnh quang màu xanh lá cây, cho thấy sự vắng mặt của sự hình thành AVO trong tế bào chất.

Hình 3. – Kích hoạt autophagy trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và sự hình thành các bào quan có tính axit (AVOs) được xác định bằng nhuộm màu cam acridine. (B) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 đã được tiếp xúc với chất curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và việc chuyển đổi LC3-I thành LC3-II đã được xác nhận bằng xét nghiệm làm mờ vết rạn da phương Tây. (C) Sau khi điều trị với lượng curcumin được chỉ định trong 48 giờ, các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được đánh giá bằng phương pháp làm mờ phương Tây cho biểu hiện của protein liên quan đến autophagy. Cur, curcumin.Hình 3. – Kích hoạt autophagy trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. (A) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và sự hình thành các bào quan có tính axit (AVOs) được xác định bằng nhuộm màu cam acridine. (B) Các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 đã được tiếp xúc với chất curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và việc chuyển đổi LC3-I thành LC3-II đã được xác nhận bằng xét nghiệm làm mờ vết rạn da phương Tây. (C) Sau khi điều trị với lượng curcumin được chỉ định trong 48 giờ, các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 được đánh giá bằng phương pháp làm mờ phương Tây cho biểu hiện của protein liên quan đến autophagy. Cur, curcumin.

Hơn nữa, chúng tôi đã phát hiện chuyển đổi protein liên kết chuỗi 1 protein 3 (LC3) từ LC3-I sang LC3-II bằng xét nghiệm làm mờ phương Tây. Khi autophagy được kích hoạt, LC3-I cư trú trong cytosol được phân cắt thành LC3-II và được tổng hợp trên màng autophagosomal. Do đó, việc chuyển đổi LC3-I sang LC3-II là một điểm đánh dấu tốt cho việc giới thiệu bệnh tự kỷ. Dữ liệu của chúng tôi cho thấy doanh thu LC3 ở cả ba dòng tế bào ung thư dạ dày khác nhau sau khi tiếp xúc với chất curcumin và sự tích lũy LC3-II có ý nghĩa hơn sau khi tăng nồng độ curcumin ( Hình 3B ). Sau đó, chúng tôi đã nghiên cứu tác dụng điều chỉnh của curcumin đối với sự biểu hiện của protein liên quan đến autophagy (Atg) trong các tế bào ung thư dạ dày bằng cách sử dụng xét nghiệm làm mờ vết rạn da phương Tây. Như thể hiện trong hình 3, các mức độ liên hợp của Beclin1, Atg7 và Atg5-Atg12 đều được điều chỉnh trong các tế bào BGC-823, SGC-7901 và MKN-28 bằng cách điều trị bằng curcumin theo cách phụ thuộc vào liều lượng, cho thấy rằng curcumin có khả năng kích hoạt mạnh biểu hiện protein Atg trong các tế bào ung thư dạ dày của con người, đó là một đặc điểm quan trọng đối với bệnh tự kỷ. Do đó, những dữ liệu này cho thấy chất curcumin có thể gây ra kích hoạt autophagy cũng như chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày của con người.

Con đường truyền tín hiệu PI3K / Akt / mTOR trong các tế bào ung thư dạ dày được điều chỉnh bởi curcumin

Vì con đường truyền tín hiệu PI3K / Akt / mTOR đã được xác nhận là đóng vai trò quan trọng trong quá trình cả apoptosis và autophagy, chúng tôi đã nghiên cứu thêm về tác dụng của curcumin đối với quá trình phosphoryl hóa của Akt, mTOR và p70S6K trong các tế bào ung thư dạ dày ở người. Kết quả của xét nghiệm làm mờ phương Tây cho thấy mức độ biểu hiện của phospho-Akt trong ba dòng tế bào (BGC-823, SGC-7901 và MKN-28) rõ ràng được điều chỉnh bằng cách điều trị bằng curcumin theo cách phụ thuộc vào liều, sau đó là điều hòa của phospho-mTOR xuôi dòng và phospho-p70S6K ( Hình 4 ). Quan sát này chỉ ra rằng chất curcumin có thể ức chế con đường truyền tín hiệu Akt / mTOR trong các tế bào ung thư dạ dày, có thể góp phần gây ra cả apoptosis và autophagy trong tế bào ung thư dạ dày của con người.

Hình 4. – Con đường truyền tín hiệu PI3K / Akt / mTOR trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. Các tế bào ung thư dạ dày được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và biểu hiện của phospho-Akt, phospho-mTOR và phospho-p70S6K được phát hiện bằng phương pháp làm mờ vết rạn da phương tây. Cur, curcumin.Hình 4. – Con đường truyền tín hiệu PI3K / Akt / mTOR trong tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng curcumin. Các tế bào ung thư dạ dày được điều trị bằng curcumin ở nồng độ chỉ định trong 48 giờ và biểu hiện của phospho-Akt, phospho-mTOR và phospho-p70S6K được phát hiện bằng phương pháp làm mờ vết rạn da phương tây. Cur, curcumin.

Tăng sinh và chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày sau khi điều trị 3-MA

Autophagy đã được báo cáo là có tác động nghịch lý đối với sự chết hoặc sống sót của tế bào ung thư với các kích thích khác nhau ( 17 , 25 ). Để nghiên cứu sự đóng góp của autophagy đối với apoptosis gây ra bởi curcumin trong các tế bào ung thư dạ dày của con người, chúng tôi đã sử dụng chất ức chế autophagy 3-MA để ngăn chặn sự hoàn thành của autophagy ở giai đoạn đầu và điều trị các tế bào ung thư bằng curcumin và 3-MA trong 48 giờ . Như được hiển thị trong Hình 5A, điều trị bằng curcumin và 3-MA làm giảm đáng kể khả năng sống của ba dòng tế bào ung thư dạ dày khác nhau, so với nhóm đối chứng được điều trị bằng curcumin đơn thuần. Hơn nữa, dữ liệu của chúng tôi chỉ ra rằng các tế bào ung thư dạ dày được điều trị bằng curcumin và 3-MA biểu hiện sự gia tăng tế bào apoptosis tăng so với nhóm đối chứng được điều trị bằng curcumin, điều này được chứng minh bằng sự kết hợp của nhuộm TUNEL, xét nghiệm tế bào học dòng chảy và xét nghiệm phương Tây Hình 5B – D ). Nói chung, những kết quả này cho thấy rằng autophagy gây ra bởi chất curcumin có thể đóng vai trò bảo vệ trong việc chết tế bào ung thư dạ dày và phòng ngừa bệnh autophagy có thể làm tăng tác dụng chống ung thư của curcumin trong ung thư dạ dày ở người.

Hình 5. – Khả năng và apoptosis trong các tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng chất ức chế curcumin và autophagy 3-MA. Các tế bào ung thư dạ dày đã được tiếp xúc với chất curcumin (15 PhaM cho các tế bào BGC-823 và 20 PatrickM cho các tế bào SGC-7901 và MKN-28) hoặc 3-MA (10 mM) hoặc kết hợp giữa curcumin và 3-MA trong 48 giờ . (A) Khả năng sống của tế bào được phát hiện bằng xét nghiệm MTT trong các tế bào ung thư dạ dày. * P <0,05 so với các tế bào được điều trị bằng curcumin đơn thuần. (B) Sự chết tế bào apoptotic được đánh giá bằng nhuộm TUNEL trong các tế bào ung thư dạ dày (độ phóng đại, × 200). (C) Tỷ lệ apoptotic được đánh giá bằng phương pháp tế bào học dòng chảy với nhuộm Phụ lục V trong các tế bào ung thư dạ dày.(D) Sự biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis được phát hiện bằng cách làm mờ vết rạn da ở tế bào ung thư dạ dày. Cur, curcumin.Hình 5. – Khả năng và apoptosis trong các tế bào ung thư dạ dày của con người sau khi điều trị bằng chất ức chế curcumin và autophagy 3-MA. Các tế bào ung thư dạ dày đã được tiếp xúc với chất curcumin (15 PhaM cho các tế bào BGC-823 và 20 PatrickM cho các tế bào SGC-7901 và MKN-28) hoặc 3-MA (10 mM) hoặc kết hợp giữa curcumin và 3-MA trong 48 giờ . (A) Khả năng sống của tế bào được phát hiện bằng xét nghiệm MTT trong các tế bào ung thư dạ dày. * P <0,05 so với các tế bào được điều trị bằng curcumin đơn thuần. (B) Sự chết tế bào apoptotic được đánh giá bằng nhuộm TUNEL trong các tế bào ung thư dạ dày (độ phóng đại, × 200). (C) Tỷ lệ apoptotic được đánh giá bằng phương pháp tế bào học dòng chảy với nhuộm Phụ lục V trong các tế bào ung thư dạ dày.(D) Sự biểu hiện của protein liên quan đến apoptosis được phát hiện bằng cách làm mờ vết rạn da ở tế bào ung thư dạ dày. Cur, curcumin.

Thảo luận

Curcumin, một polyphenol tự nhiên có nguồn gốc từ củ nghệ ( Curcuma longa ), đã được báo cáo là một phương thuốc truyền thống tiềm năng trong phòng ngừa và điều trị ung thư với an toàn dược lý ( 16 , 26 ). Tuy nhiên, tác dụng của curcumin đối với ung thư dạ dày ở người và các cơ chế cơ bản chưa được chứng minh rõ ràng. Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng chất curcumin làm suy giảm sự tăng sinh tế bào ung thư dạ dày, gây chết tế bào apoptotic và ức chế mật độ mạch bạch huyết in vivo hoặc in vitro ( 27 – 29). Trong nghiên cứu hiện tại, chúng tôi đã cung cấp bằng chứng đầu tiên rằng chất curcumin ức chế sự tăng trưởng tế bào và gây ra bệnh tự kỷ bảo vệ chống lại sự chết tế bào apoptotic trong ung thư dạ dày của con người.

Là một tác nhân chống ung thư, curcumin đã được báo cáo đóng một vai trò mạnh mẽ trong việc điều chỉnh sự tăng sinh và apoptosis trong các loại ung thư. Bimonte et al tiết lộ rằng điều trị bằng curcumin ức chế sự phát triển khối u và sự hình thành mạch trong ung thư vú ở người cả in vivo và in vitro ( 14 ). Koprowski và cộng sự tiết lộ rằng chất curcumin có thể gây ức chế tăng trưởng và apoptosis của ung thư đường mật ở nồng độ điều trị thấp ( 30 ). Zou và cộng sự đã báo cáo rằng một chất tương tự của curcumin, WZ35, thể hiện tác dụng chống ung thư đối với bệnh ung thư dạ dày thông qua việc kích hoạt các con đường apoptotic căng thẳng JNK và ER qua trung gian thế hệ ROS ( 31 ).

Trong nghiên cứu hiện tại, sự tăng sinh rõ ràng đã bị ức chế theo cả cách thức phụ thuộc vào thời gian và liều lượng trong ba dòng tế bào ung thư dạ dày khác nhau (BGC-823, SGC-7901 và MKN-28) được điều trị bằng curcumin. Hơn nữa, curcumin đã được chứng minh là gây ra apoptosis rõ rệt trong các tế bào ung thư dạ dày của con người theo cách phụ thuộc vào liều, được truyền tải bằng sự gia tăng các tế bào dương tính với TUNEL và dân số apoptosis bằng phương pháp tế bào học dòng chảy, cũng như sự điều hòa của các protein liên quan đến apoptosis . Phù hợp với những phát hiện của chúng tôi, các nghiên cứu chủ yếu tập trung vào apoptosis để làm sáng tỏ các cơ chế mà curcumin phát huy tác dụng chống ung thư của nó ( 16 , 28). Tuy nhiên, vai trò của autophagy gây ra bởi curcumin và cơ chế chính xác liên quan đến sự tương tác giữa apoptosis và autophagy với điều trị curcumin nói chung chưa được làm rõ, đặc biệt là trong ung thư dạ dày ở người.

Autophagy, một quá trình thoái hóa dị hóa trong đó các protein hoặc bào quan của tế bào bị thoái hóa trong lysosome và được tái chế, được chỉ định là một dạng không chết của tế bào được lập trình được gọi là chết tế bào do autophagy gây ra. Nó gần đây đã nổi lên như một người chơi quan trọng trong sự phát triển của các bệnh khác nhau, đặc biệt là ung thư. Các nghiên cứu tích lũy đã báo cáo rằng các hợp chất hoặc chiết xuất từ ​​thực vật có đặc tính chống ung thư, như curcumin, có thể gây ra bệnh autophagy trong các loại ung thư khác nhau và người ta đã xác định rằng vai trò của autophagy trong ung thư ở người là phức tạp. Kim et al tiết lộ rằng autophagy gây ra bởi curcumin hoạt động như một tín hiệu pro-death, góp phần làm giảm sự sống sót của các tế bào ung thư miệng ( 32 ). Ngược lại, Zhou et alđã chứng minh rằng một chất tương tự curcumin mới EF25- (GSH) 2 gây ra bệnh autophagy có thể bị ức chế bởi chloroquine, do đó dẫn đến tăng cường apoptosis và độc tế bào trong ung thư biểu mô tế bào gan ( 33 ). Hơn nữa, Wang và cộng sự tiết lộ rằng quercetin có thể gây ra sự chết tế bào tự hủy đối kháng tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày, bằng cách điều chỉnh các con đường truyền tín hiệu Akt / mTOR và HIF-1α ( 20 ).

Trong nghiên cứu hiện nay, điều trị bằng curcumin gây ra sự hình thành phụ thuộc liều của các bào quan có tính axit (AVOs) trong các tế bào ung thư dạ dày của con người. Western blot cũng đã chứng minh sự chuyển đổi từ LC3-I sang LC3-II và biểu hiện điều hòa của các protein liên quan đến autophagy bao gồm Beclin1, Atg7 và Atg5-Atg12 trong các tế bào ung thư dạ dày tiếp xúc với curcumin. Những thay đổi đặc trưng này lần đầu tiên chứng minh rằng chất curcumin có thể kích hoạt quá trình tự phát trong tế bào ung thư dạ dày của con người trong ống nghiệm . Hơn nữa, liệu autophagy gây ra bởi curcumin đóng vai trò bảo vệ hoặc thúc đẩy sự chết tế bào trong ung thư dạ dày đã được xác nhận sau đó trong cuộc điều tra của chúng tôi.

Con đường báo hiệu PI3K / Akt / mTOR đã được báo cáo là yếu tố điều chỉnh tiêu cực chính của cả apoptosis và autophagy. Nhiều phân tử tín hiệu của con đường PI3K / Akt / mTOR có đặc tính gây ung thư và kích hoạt cấu thành đường dẫn tín hiệu này thường liên quan đến sự tiến triển của các bệnh ung thư khác nhau ở người ( 34 , 35 ). Trái ngược với các gen ức chế khối u như PTEN và p53 có thể kích thích bệnh autophagy, gen gây ung thư PI3K và Akt đã được xác nhận có vai trò ức chế kích hoạt autophagy. Kết quả của nghiên cứu này của chúng tôi cho thấy điều trị curcumin rõ ràng là ức chế sự phosphoryl hóa Akt và mTOR hạ lưu cũng như p70S6K trong tất cả ba dòng tế bào ung thư dạ dày con người khác nhau trong ống nghiệm. Phát hiện này chỉ ra rằng sự ức chế đường truyền tín hiệu PI3K / Akt / mTOR có thể đóng một vai trò quan trọng trong quá trình tự trị của các tế bào ung thư dạ dày được điều trị bằng curcumin. Tuy nhiên, vì các đường dẫn tín hiệu khác như Erk1 / 2, AMPK và JNK cũng có thể chịu trách nhiệm kích hoạt autophagy, nghiên cứu sâu hơn vẫn được bảo đảm trong tương lai.

Ngoài ra, chất ức chế autophagy 3-MA đã được sử dụng trong nghiên cứu này, để ngăn ngừa bệnh autophagy nhằm nghiên cứu thêm vai trò kép của autophagy gây ra bởi curcumin trong các tế bào ung thư dạ dày. Do đó, kết quả của chúng tôi đã chứng minh rằng ức chế autophagy làm giảm đáng kể khả năng sống của tế bào và tăng cường sự chết tế bào apoptotic trong các tế bào ung thư dạ dày của con người được điều trị bằng curcumin. Những phát hiện này cho thấy việc ngăn ngừa bệnh autophagy đã thúc đẩy đáng kể hiệu quả chống ung thư và độc tính của chất curcumin trong ung thư dạ dày. Nói cách khác, autophagy gây ra bởi chất curcumin đóng vai trò bảo vệ ung thư dạ dày của con người, có thể dẫn đến kháng thuốc bởi curcumin trong điều trị ung thư. Vì thế,

Tóm lại, nghiên cứu hiện tại lần đầu tiên chứng minh rằng tác dụng chống ung thư của curcumin có liên quan đến việc ức chế sự tăng sinh và thúc đẩy sự chết tế bào apoptotic trong tế bào ung thư dạ dày. Hơn nữa, nghiên cứu hiện tại cung cấp bằng chứng đầu tiên cho thấy chất curcumin gây ra sự chết tế bào tự hủy đối kháng bảo vệ tế bào apoptotic trong tế bào ung thư dạ dày của con người và sự kết hợp của chất curcumin với chất ức chế autophagy có thể tăng cường độc tính chống ung thư của thuốc hóa trị liệu này. Do đó, có thể kết luận rằng những phát hiện của chúng tôi cung cấp một chiến lược có giá trị để cải thiện việc điều trị bằng curcumin hoặc chất tương tự của nó trong ung thư dạ dày ở người.

Lời cảm ơn

Nghiên cứu hiện tại được hỗ trợ bởi Quỹ khoa học tự nhiên quốc gia Trung Quốc (cấp số 81402280), Quỹ từ Phòng thí nghiệm khoa học y tế và phòng thí nghiệm y học quan trọng của Giang Tô (JSKLM-2014-005) và Quỹ bác sĩ của Bệnh viện nhân dân đầu tiên của Lianyungang (cấp số BS1503).

  1. Tài liệu tham khảo
  2. Kim MJ và Kim H: Tác dụng chống ung thư của lycopene trong gây ung thư dạ dày. J Ung thư Trước đó. 20: 92 bóng96. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  3. Jeong SH, Kim YW, Yu W, Lee SH, Park YK, Park SH, Jeong IH, Lee SE, Park Y và Lee YJ: Tỷ lệ mắc bệnh cao trong bệnh nhồi máu cơ tim và bệnh nhân suy tim sau phẫu thuật ung thư dạ dày. Thế giới J Gastroenterol. 21: 6631 Mã6638. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  4. Ford H và Gounaris I: Docetaxel và tiềm năng của nó trong điều trị ung thư biểu mô tuyến thực quản chịu lửa. Trị liệu Adv Gastroenterol. 8: 189 Pháo205. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  5. Du W, Li C, Wang H, Zhao A, Shen J, Yong F và Jia H: Hiệu quả của hóa trị tân dược đối với giá trị MAC-BAR của Sevoflurane đối với bệnh nhân trải qua phẫu thuật ung thư dạ dày triệt để. Int J Clinic Exp Med. 8: 5649 Từ5657. 2015. PubMed / NCBI
  6. Alizadeh AM, Sadeghizadeh M, Najafi F, Ardestani SK, Erfani-Moghadam V, Khaniki M, Rezaei A, Zamani M, Khodayari S, Khodayari H, et al: Encapsulation của curcumin trong điều trị ung thư Biomed Res Int. 824746: 20152015.
  7. Chang R, Sun L và Webster TJ: Giao tiếp ngắn: Độc tính tế bào chọn lọc của curcumin trên các tế bào xương so với các nguyên bào xương khỏe mạnh. Int J Nanomeesine. 9: 461 2014. PubMed / NCBI
  8. Zanotto-Filho A, Braganhol E, Klafke K, Hình Ung thư Lett. 358: 220 vang231. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  9. Marquest JU, Gomez-Quiroz L, Camacho LO Arreguin, Pinna F, Lee YH, Kitade M, Domínguez MP, Castven D, Breuhahn K, Conner EA, et al: Curcumin có hiệu quả ức chế tín hiệu NF-B gây ung thư ung thư. J Hepatol. 63: 661 Ảo669. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  10. Shakibaei M, Kraehe P, Popper B, Shayan P, Goel A và Buhrmann C: Curcumin tăng cường hoạt động chống ung thư của 5-fluorouracil trong môi trường vi mô khối u alginate 3D của ung thư đại trực tràng. Ung thư BMC. 15: 2502015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  11. Wu J, Cai Z, Wei X, Chen M, Ying S, Shi L, Xu RA, He F, Liang G và Zhang X: Hoạt động chống ung thư phổi của chất tương tự curcumin JZ534 in vitro. Biomed Res Int. 2015: 5045292015. PubMed / NCBI
  12. Terlikowska KM, Witkowska AM, Zujko ME, Dobrzycka B và Terlikowski SJ: Ứng dụng tiềm năng của curcumin và các chất tương tự của nó trong chiến lược điều trị của bệnh nhân ung thư buồng trứng nguyên phát. Int J Mol Sci. 15: 21703 212222. 2014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  13. Coleman DT, Soung YH, Surh YJ, Cardelli JA và Chung J: Curcumin ngăn chặn quá trình palmitoylation của integrin β4 trong các tế bào ung thư vú. PLoS Một. 10: e01253992015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  14. Mishra A, Kumar R, Tyagi A, Kohaar I, Hedau S, Bharti AC, Sarker S, Dey D, Saluja D và Das B: Curcumin điều chỉnh tế bào AP-1, NF-kB và ung thư miệng trong các protein HPV16 E6. Khoa học kinh tế. 9: 5252015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  15. Bimonte S, Barbieri A, Palma G, Rea D, Luciano A, DAiuto M, Arra C và Izzo F: Phân tích vai trò của curcumin đối với sự phát triển khối u và sự hình thành mạch trong mô hình chuột của ung thư vú ở người. Biomed Res Int. 878134: 20152015.
  16. Wu J, Lu WY và Cui LL: Tác dụng ức chế của curcumin đối với sự xâm lấn của tế bào ung thư biểu mô tế bào vảy da A431. Ung thư Pac J Châu Á Trước đó. 16: 2813 Kính2818. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  17. Amin AR, Haque A, Rahman MA, Chen ZG, Khuri FR và Shin DM: Curcumin gây ra apoptosis của các tế bào ung thư đường tiêu hóa trên bằng cách nhắm mục tiêu nhiều con đường. PLoS Một. 10: e01242182015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  18. Zhi X và Zhong Q: Autophagy trong bệnh ung thư. F1000Prime 7: 182015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  19. Galluzzi L, Pietrocola F, Bravo-San Pedro JM, Amaravadi RK, Baehrecke EH, Cecconi F, Codogno P, Debnath J, Gewirtz DA, Karantza V, et al: Autophagy trong chuyển đổi ác tính và tiến triển ung thư. EMBO J. 34: 856 Tiếng880. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  20. Zarzynska JM: Tầm quan trọng của quy định tự trị trong phát triển và điều trị ung thư vú. Biomed Res Int. 2014: 7103452014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  21. Wang K, Liu R, Li J, Mao J, Lei Y, Wu J, Zeng J, Zhang T, Wu H, Chen L, et al: Quercetin gây ra bệnh tự kỷ bảo vệ trong các tế bào ung thư dạ dày: Sự tham gia của Akt-mTOR- và thiếu oxy yếu tố gây ra tín hiệu qua trung gian 1α. Tự kỷ. 7: 966 cường978. 2011. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  22. Lin Y, Wang K, Hu C, Lin L, Qin S và Cai X: Elemene tiêm gây ra bệnh tự kỷ bảo vệ các tế bào ung thư tế bào gan của con người khỏi bị đói và trải qua quá trình apoptosis. Evid Dựa Bổ sung Alternat Med. 2014: 6375282014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  23. Zhang SF, Wang XL, Yang XQ và Chen N: Autophagy liên quan đến con đường nhắm mục tiêu của các sản phẩm tự nhiên trong điều trị ung thư. Ung thư Pac J Châu Á Trước đó. 15: 10557 cường10563. 2014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  24. Zhang MS, Niu FW và Li K: Proflavin ngăn chặn sự phát triển của các tế bào MG63 của người xương thông qua quá trình tự hủy và tự kỷ. Oncol Lett. 10: 463 bóng468. 2015. PubMed / NCBI
  25. Liu D, Gao M, Yang Y, Qi YU, Wu K và Zhao S: Ức chế tự kỷ thúc đẩy quá trình apoptosis tế bào gây ra bởi chất ức chế proteasome MG-132 trong tế bào ung thư biểu mô tế bào vảy ở người EC9706. Oncol Lett. 9: 2278 Từ2282. 2015. PubMed / NCBI
  26. Wang X, Qi W, Li Y, Zhang N, Dong L, Sun M, Cun J, Zhang Y, Lv S và Yang Q: Huaier chiết xuất gây chết tế bào autophagic bằng cách ức chế con đường mTOR / S6K trong các tế bào ung thư vú. PLoS Một. 10: e01317712015. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  27. Rahmani AH, Al Zohurine MA, Aly SM và Khan MA: Curcumin: Một ứng cử viên tiềm năng trong phòng ngừa ung thư thông qua điều chế các con đường phân tử. Biomed Res Int. 2014: 7616082014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  28. Liu X, Sun K, Song A, Zhang X, Zhang X, He X và Xiaodong H: Curcumin ức chế sự tăng sinh của các tế bào ung thư dạ dày bằng cách làm suy yếu việc mở kênh kali nhạy cảm ATP. Thế giới J Phẫu thuật Oncol. 12: 3892014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  29. Liang T, Zhang X, Xue W, Zhao S, Zhang X và Pei J: Curcumin gây ra ung thư dạ dày ở người BGC-823 tế bào apoptosis bằng con đường báo hiệu căng thẳng ASK1-MKK4-JNK qua trung gian ROS. Int J Mol Sci. 15: 15754 Ảo15765. 2014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  30. Da W, Zhu J, Wang L và Sun Q: Curcumin ức chế mật độ mạch bạch huyết trong một mô hình ung thư dạ dày của con người in vivo. Khối u sinh học. 36: 5215 Từ5223. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  31. Koprowski S, Sokolowski K, Kunnimalaiyaan S, Gamblin TC và Kunnimalaiyaan M: Điều hòa qua trung gian Curcumin của Notch1 / lông và chất tăng cường của split-1 / Survivin: Nhắm mục tiêu phân tử trong ung thư đường mật. J Phẫu thuật Res. 198: 434 Ném440. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  32. Zou P, Zhang J, Xia Y, Kanchana K, Guo G, Chen W, Huang Y, Wang Z, Yang S và Liang G: Thế hệ ROS làm trung gian tác dụng chống ung thư của WZ35 thông qua kích hoạt JNK và ER gây căng thẳng trong con đường apoptotic trong dạ dày ung thư. Nhắm mục tiêu. 6: 5860 Từ5876. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  33. Kim JY, Cho TJ, Woo BH, Choi KU, Lee CH, Ryu MH và Park HR: Bệnh tự kỷ do Curcumin gây ra góp phần làm giảm sự sống sót của các tế bào ung thư miệng. Arch uống Biol. 57: 1018 bóng1025. 2012. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  34. Chu T, Ye L, Bai Y, Sun A, Cox B, Liu D, Li Y, Liotta D, Snyder JP, Fu H, et al: Autophagy và apoptosis trong carcinoma tế bào gan gây ra bởi EF25- (GSH) 2 Một curcumin tiểu thuyết tương tự. PLoS Một. 9: e1078762014. Xem bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI
  35. Yip PY: Phosphatidylinositol 3-kinase-AKT-động vật có vú của rapamycin (PI3K-Akt-mTOR) trong con đường truyền tín hiệu trong ung thư phổi không phải tế bào nhỏ. Dịch Ung thư phổi Res. 4: 165 đỉnh176. 2015. PubMed / NCBI
  36. Cheaib B, Auguste A và Leary A: Con đường PI3K / Akt / mTOR trong ung thư buồng trứng: Cơ hội và thách thức điều trị. Ung thư Chin J. 34: 4 C1616. 2015. Xem Bài viết : Google Scholar : PubMed / NCBI

Viết một bình luận

3 × two =

0904 3979 77